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五分钟完成粘末端连接?Fast-Link™ DNA Ligation Kit,您值得拥有!

作者:admin 信息来源:ob游戏 日期:20190610 打印 字体:  
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酶是生物体非常重要的一类蛋白质,之前小达君给大家安利了Lucigen的RNase R(RNase R——RNase家族的“外貌协会成员”)和CircLigase™ II ssDNA Ligase“单链DNA环化连接酶——CircLigase™ II ssDNA Ligase”),今天继续给大家介绍一款特色的DNA连接酶,完整的DNA连接试剂盒可以让您在5min内完成DNA重组,一起来了解下吧~

Fast-Link™ DNA Ligation Kit

Fast-Link™ DNA Ligation Kit使用了高质量的连接酶 (Fast-Link T4 DNA Ligase), 可提供快速高效的DNA连接,粘末端的连接可在室温5分钟内完成。另外,在转化感受态细胞前,与其他连接酶相比,Fast-Link™ DNA Ligation Kit的连接产物不需要脱盐,操作更简便。


应用

★ PCR产物的平末端和TA克隆

★ 测序接头与平末端的连接

★ 基因组DNA的克隆和亚克隆

★ BAC/fosmid文库构建

★cDNA克隆

★ 接头连接

Type of End

Ligation Time

% White Colonies

Recombinants per µg DNA

Overhang

5 min.

93

2.0 x 106

Blunt

15 min.

71

4.4 x 105

PCR product with 3´-A overhang

1 hr.

68

1.2 x 104

表1    Fast-Link™连接不同产物的测试数据


实验结果



图1. 使用Fast-Link™ Kit粘末端连接的过程

按标准连接反应使用2U Fast-Link™ ligase进行Lambda Hind III markers连接(泳道2-6). 泳道M, 1-kb ladder;泳道1,无酶对照;泳道2-6, 分别为5 min, 15 min, 30 min, 1 hr, 2 hr连接结果。  


图2. 使用Fast-Link™ Kit平末端连接过程

pUC 19 DNA用Pvu II消化,然后按标准连接反应使用2U Fast-Link™ ligase进行连接(泳道1-6). 泳道 M,1-kb ladder;泳道1,无酶对照;泳道2-6, 分别为5 min, 15 min, 30 min, 45min, 1 hr连接结果。


产品优势

★ 室温五分钟完成粘末端连接 (图1)

★ 室温15分钟完成平末端连接 (图2)

★在16℃下连接PCR产物(A端突出),在1小时内完成,高连接效率(表1)

★在转入大肠菌感受态细胞前,快速连接反应不需要脱盐处理

★ 进行BAC连接,插入> 100 kb可在4小时内进行,而不像其它的连接酶需要过夜反应

产品内容物

Fast-Link DNA Ligase (2 U/μL)

Fast-Link™ 10X Ligation Buffer

ATP (10 mM)

说明书链接(请点击阅读原文):http://www.lucigen.com/docs/manuals/MA086E-Fast-Link-Kits.pdf

产品信息

分类

货号

产品名称

规格

网站报价

品牌

依赖ATPDNA连接酶

LK0750H

FAST-LINK™ DNA LIGATION KIT

50 rxns

¥1,937

Lucigen

LK6201H

FAST-LINK™ DNA LIGATION KIT

100 rxns

¥3,172

Lucigen

依赖NAD+DNA连接酶

A0102K

Ampligase® DNA Ligase with Buffer

2,500 U @ 100 U/μl

¥3,406

Lucigen

A0110K

Ampligase® DNA Ligase without Buffer

10,000 U @ 100 U/μl

¥8,827

Lucigen

A1905B

Ampligase® 10X Reaction Buffer

5 ml

¥858

Lucigen

A3202K

Ampligase® DNA Ligase with Buffer

2,500 U @ 5 U/μl

¥3,601

Lucigen

A3210K

Ampligase® DNA Ligase without Buffer

10,000 U @ 5 U/μl

¥9,009

Lucigen

A32750

Ampligase® DNA Ligase with Buffer

750 U @ 5 U/μl

¥1,651

Lucigen

A8101

Ampligase® DNA Ligase Kit

1,000 U @ 5 U/μl

¥2,327

Lucigen


品牌介绍

美国Lucigen公司成立于1998年,提供各类用于分子生物学相关产品,可以使研究者成功克隆较难克隆的基因,其在2016年收购了Illumina旗下Epicentre产品线。目前产品类别主要包括:体外转录、基因克隆(BAC克隆试剂盒)、感受态细胞(TG1噬菌体文库构建感受态)、体外扩增、转座子突变、蛋白表达、文库构建等。


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