IP干货带着促销它来了-重链轻链非特异结合怎么办?_公司新闻_关于达科为_亚博全意甲
您好,欢迎光临亚博全意甲物城!
免费热线电话 : 400 819 7199 收藏亚博全意甲物城
当前位置: 亚博全意甲 > 关于达科为 > 亚博全意甲新闻 > 正文

IP干货带着促销它来了-重链轻链非特异结合怎么办?

作者:admin信息来源:达科为日期:2021年09月09日打印字体:  
分享到:

免疫沉淀 (Immunoprecipitation,IP) 是利用抗原抗体特异性反应纯化富集目的蛋白的一种方法。抗体与细胞裂解液或表达上清中相应的蛋白结合后,再与ProteinA/G偶联的agarose或Sepharose珠子孵育,通过离心得到珠子-蛋白A/G-抗体-目的蛋白复合物,沉淀经过洗涤后,重悬于电泳上样缓冲液,煮沸5-10min,在高温及还原剂的作用下,抗原与抗体解离,离心收集上清,上清中包括抗体、目的蛋白和少量的杂蛋白。
 

图1.IP原理及流程

 

在免疫沉淀实验后的WB验证环节中,当使用常规的 Anti-IgG (H+L) 酶标二抗时,通常会出现对应免疫沉淀一抗变性后产生的重链(50kDa)和轻链(25kDa)两条带。如果检测的目的蛋白分子量在此附近时,就会受到这两条带的干扰。
 

图2.传统二抗WB验证IP,重链轻链干扰

 

那么如何避免避免IP检测过程中的重、轻链干扰,达科为可为您提供两种解决方案:

方案一:WB抗体和IP抗体选择不同种属

 

 

方案二:选择只识别天然二硫键构象的二抗

Rockland TrueBlot®二抗,是一系列单克隆二抗,与传统二抗不同的是,TrueBlot®二抗只识别天然二硫键的IgG,而不识别被还原打开的二硫键,因此可以消除IP检测过程中变性抗体重链和轻链的影响。


图3.Rockland TrueBlot®二抗vs 传统二抗

 

TrueBlot®系列产品注意事项

1. TrueBlot®产品适用的前提:当IP抗体与WB一抗同源。

2. Rabbit TrueBlot®不能与Protein A/G结合的Beads一起用。推荐TrueBlot®配套的Beads。

3. 非IP验证的WB实验也可使用TrueBlot®系列产品避免重链和轻链的影响。


促销活动

促销活动活动范围:Rockland全系列二抗(包括TrueBlot®系列二抗)

活动内容:请咨询当地业务员

活动时间:即日起到9.30日

活动代码:DIST-Q3CNSEC

 

Rockland热卖TrueBlot®产品列表

 

欢迎联系当地业务员索取高清版TrueBlot®选择指南


更多信息请关注公众号“亚博全意甲物城”

微博名称:亚博全意甲物城
微博地址:
http://e.weibo.com/bjdakewe

微信二维码:
上海亚博全意甲  沪ICP备17056487号
全国免费热线:400 819 7199 Email:9630128754@qq.comet
联系亚博全意甲
© Copyright 2013 Hewlett-Packard Development Company, L.P. All Rights
亚博投注赞助意甲 :站长工具 - 亚博全意甲_亚博棋牌官网_亚博投注赞助意甲